Forskjell mellom versjoner av «BioHackerLab»

Fra Bitraf
Hopp til navigering Hopp til søk
(Notater om PCR-prosjekt)
(PCR prosjekt)
Linje 52: Linje 52:
 
Fast utstyr:
 
Fast utstyr:
  
*PCR-maskin/thermocycler. Automatiserer temperatureguelering gjennom reaksjonsforløpet. Temperatur-regulering kan i teorien gjøres manuelt med vannbad ved ulike temperaturer, men temmelig langsomt og kjedelig!
+
*PCR-maskin/thermocycler. Automatiserer temperaturegulering gjennom reaksjonsforløpet. Temperatur-regulering kan i teorien gjøres manuelt med vannbad ved ulike temperaturer, men dette blir temmelig langsomt og kjedelig!
 
*Mikropipette(r)
 
*Mikropipette(r)
*Glassflaske (til agarose)
+
*En eller flere fasker til agarose, ca. 250 mL (fortrinnsvis glass, bør passe i mikrobølgeovn)
*Mikrobølgeovn, evt. annen varmekilde (til oppvarming av agarose)
+
*Mikrobølgeovn (til oppvarming av agarose), evt. annen varmekilde + magnetrører
 +
*Bør ha: Mikrosentrifuge.
  
 
For visualisering av DNA-fragmenter:
 
For visualisering av DNA-fragmenter:
 
*Gel-elektroforesekammer
 
*Gel-elektroforesekammer
*Strømforskyning
+
*Strømforsyning
 
*Transilluminator m/filter og/eller filterbriller
 
*Transilluminator m/filter og/eller filterbriller
  
Linje 70: Linje 71:
 
*PCR mastermix
 
*PCR mastermix
 
*TAE buffer
 
*TAE buffer
*DNA-fargestoff
+
*DNA-fargestoff (riktig type med hensyn til transilluminator)
 
*DNA-ladder (standard-fragmenter til elektroforese)
 
*DNA-ladder (standard-fragmenter til elektroforese)
*DNA primere
 
 
*Elektroforese-agarose
 
*Elektroforese-agarose
 +
*DNA primere (eksperiment-spesifikke)
 +
 +
Sikkerhetsutstyr:
 +
*Vernebriller
 +
*Engangshansker
 +
*Varmeisolerende hansker e.l. til håndtering av varm agarose
 +
 +
Sikkerhetsmomenter:
 +
*Strøm gjennom elektroforesebad (ca. 50-100 V)
 +
*Varm agaroseløsning
 +
*Støtkoking eller glasseksplosjon ved oppvarming av agarose i mikrobølgeovn
 +
 +
Avfallshåndtering, generelt:
 +
*Størknet agarose kastes som restavfall. Flytende agarose må ikke tømmes i avløp, da dette vil størkne ved avkjøling.
 +
*Øvrige flytende reagenser kan helles i avløp
 +
*Forbruksmateriell av plast med eventuelle reagensrester kastes i restavfall

Revisjonen fra 19. mai 2016 kl. 11:26

BitLab? BioRaf?

Planlegging

Det har i det siste vært diskusjoner om å starte en egen lab for biologi på Bitraf. Bitraf har allerede medlemmer som jobber med hydroponics/aquaphonics og flere er interessert i ølbrygging. 18 Mai 2016 var det første møtet for folk som er interessert i å starte opp dette. Ønsket er å utvide foreningen med et lokale som egner seg for Gjør-det-selv-biologi og Biologi-hacking som retter seg etter norsk lov og de etiske retningslinjene fremsatt av European DIYbio Congress.

Summary from Bitraf's 1'st MeetUp: https://drive.google.com/file/d/0B5j_-m_-t56rMXNHVVkwVEpUVjg/view

Courses and Equipment: https://docs.google.com/spreadsheets/d/1M2TKaHVBQ3iLuV55A8JCwTCzPXx_aNDFoxyzZBgSM8o/edit#gid=0

Videre jobbing

De av deltakerne som ønsket å jobbe med dette videre delte seg i to grupper som skal jobbe med Mikrobiologi og Utstyr til labben. Mikrobiologi-gruppen har planer for å jobbe med ølbrygging og klassifisering av gjær med Open PCR.

Utstyr vi ønsker oss

  • OpenPCR
  • UV-kamera
  • Fumehood
  • Filter til Fumehood
  • Høypresisjons pipetter
  • Sentrifuge
  • Vortexer
  • Fryser
  • Elektroforese
  • Varmeskap med shaker
  • Mikroskop
  • Steam cooker for cleaning
  • Lab-glass (flasker, rør m.m.)
  • Filter-utstyr
  • Vekst-medier
  • Qubit Spectrometer (or similar)

I tillegg trenger vi også møblene til et slikt lokale. I Pløens Gate 4 finnes det ledige lokaler som man etter hvert kan etablere selve Lab'en i, men dette ligger et stykke fremover i tid. Finansiering må på plass før man kan ta over mere areal.

PCR prosjekt

Hva er PCR?

  • Polymerase chain reaction/polymerase kjedereaksjon: https://en.wikipedia.org/wiki/Polymerase_chain_reaction
  • PCR brukes for å kopiere DNA. En PCR-maskin med reagenser er en "kopi-maskin" for DNA.
  • PCR kan brukes til å opparbeide (amplifisere) DNA fra naturlige kilder/biologisk materiale for videre bearbeidelse.
  • DNA-fragmenter med en kjent sekvens (rekkefølge på nukleotider, "bokstavene" i DNA) i hver ende velges ut og kopieres selektivt.
  • Sammensetning og lengde av DNA-tråden mellom start- og sluttpunktet kan variere. Informajson om lengden av DNA-fragmentene (visualiseres ved gel-elektroforese), og om kopiering fant sted (positiv/negativ reaksjon) kan brukes til å gjøre enkle genetiske analyser.
  • Opparbeidet DNA kan (gitt god nok mengde og kvalitet) sendes til nærmere analyse av DNA-sekvensen (sekvensering).

Hvorfor gjøre PCR?

  • En (relativt) lavterskel aktivitet, med begrenset behov for opplæring, gode muligheter for å lykkes, overkommelige kostnader og få risikomomenter.
  • En klassisk molekylærbiologi-teknikk. I daglig bruk verden over. Uunnværlig for molekylærbiologisk forskning og medisinsk diagnostikk. Nobelpris-vinnende.
  • Potensiale for praktiske anvendelser med allmenn interesse. F.eks kontroll av artsopprinnelse for matvarer.

Hva trengs for PCR?

Fast utstyr:

  • PCR-maskin/thermocycler. Automatiserer temperaturegulering gjennom reaksjonsforløpet. Temperatur-regulering kan i teorien gjøres manuelt med vannbad ved ulike temperaturer, men dette blir temmelig langsomt og kjedelig!
  • Mikropipette(r)
  • En eller flere fasker til agarose, ca. 250 mL (fortrinnsvis glass, bør passe i mikrobølgeovn)
  • Mikrobølgeovn (til oppvarming av agarose), evt. annen varmekilde + magnetrører
  • Bør ha: Mikrosentrifuge.

For visualisering av DNA-fragmenter:

  • Gel-elektroforesekammer
  • Strømforsyning
  • Transilluminator m/filter og/eller filterbriller

Forbruksmateriale:

  • Eppendorf-rør (plastrør, ca. 1.5 mL)
  • PCR-rør (plastrør, ca 0.5 mL)
  • Pipette-spisser

Reagenser:

  • PCR mastermix
  • TAE buffer
  • DNA-fargestoff (riktig type med hensyn til transilluminator)
  • DNA-ladder (standard-fragmenter til elektroforese)
  • Elektroforese-agarose
  • DNA primere (eksperiment-spesifikke)

Sikkerhetsutstyr:

  • Vernebriller
  • Engangshansker
  • Varmeisolerende hansker e.l. til håndtering av varm agarose

Sikkerhetsmomenter:

  • Strøm gjennom elektroforesebad (ca. 50-100 V)
  • Varm agaroseløsning
  • Støtkoking eller glasseksplosjon ved oppvarming av agarose i mikrobølgeovn

Avfallshåndtering, generelt:

  • Størknet agarose kastes som restavfall. Flytende agarose må ikke tømmes i avløp, da dette vil størkne ved avkjøling.
  • Øvrige flytende reagenser kan helles i avløp
  • Forbruksmateriell av plast med eventuelle reagensrester kastes i restavfall